近年来，肿瘤免疫治疗迅速发展，以抗PD-1抗体和抗PD-L1抗体为代表的免疫检查点抑制剂成为临床研究的热点。2018年，四个免疫检查点抑制剂纳武利尤单抗（Ni vol umab）、帕博利珠单抗（Pembr ol i zumab）、特瑞普利单抗、信迪利单抗相继在我国获批上市。2019年，与免疫检查点抑制剂（抗PD-1抗体和抗PD-L1抗体）配套使用的1个PD-L1抗体检测试剂在我国获批上市。本文将对免疫检查点抑制剂（抗PD-1抗体和抗PD-L1抗体）和PD-L1抗体检测试剂进行简要介绍，为PD-L1抗体检测试剂的科学审评提供参考。

    免疫检查点抑制剂作用机制

T细胞的完全活化依靠“双信号”系统调控。第一信号来自T细胞表面的TCR（T细胞受体）与抗原呈递细胞（APC）表面的主要组织相容性复合体（MHC）的特异性结合，即T细胞识别抗原的过程；第二信号来自协同刺激因子，协同刺激因子有两种，一种为激活性协同刺激因子，另一种为抑制性协同刺激因子，后者可以防止T细胞过度活化而伤及其他正常组织。

肿瘤细胞为了逃脱免疫的攻击，在受到肿瘤微环境相应细胞因子的刺激后，可在其细胞表面迅速上调抑制性协同刺激因子的表达，以抑制T细胞的免疫应答，PD-L1蛋白即是肿瘤细胞表达的抑制性协同刺激因子，其可通过与T细胞表面表达的PD-1蛋白相互作用，向T细胞传递抑制性信号，阻断T细胞的免疫应答。

免疫检查点抑制剂（抗PD-1抗体或抗PD-L1抗体）通过阻断T细胞表面PD-1与肿瘤细胞表面PD-L1的结合，解除肿瘤细胞对T细胞的抑制，重建T细胞对肿瘤细胞的杀伤功能。

PD-1是一种跨膜蛋白，在T细胞未活化时几乎不表达，只有在T细胞活化后才会表达。除了在活化的T细胞上表达之外，PD-1还在活化的B细胞、自然杀伤细胞、单核细胞以及部分肿瘤细胞中表达。PD-L1也是一种跨膜蛋白，诱导表达于T细胞、树突状细胞和巨噬细胞等免疫细胞中，肿瘤细胞在受到干扰素和其他炎症因子刺激后也会迅速上调表达PD-L1。

    已获批上市产品情况

目前，美国FDA已批准多种抗PD-1抗体和抗PD-L1抗体药物，如Pembrol izumab、Atezol izumab、Durval umab和Avel umab等。FDA批准的与免疫检查点抑制剂（抗  PD-1抗体或抗PD-L1抗体）配套使用的检测试剂共有4种（见表），均为PD-L1抗体检测试剂，用于PD-L1识别的单克隆抗体克隆号分别为28-8 、22C3、SP142和SP263。4种检测试剂用到的抗体不同，不同检测试剂对同一癌种PD-L1阴阳性阈值的设定不同，同一检测试剂对不同癌种PD-L1阴阳性阈值的设定也不同。4种PD-L1抗体检测试剂的阈值设定与预期用途如下。

PD-L1 IHC 28-8 phar mDx

采用兔单抗28-8及EnVision FLEX可视系统，检测非小细胞肺癌、头颈鳞状细胞癌、尿道上皮癌和黑色素瘤患者肿瘤组织FFPE中的PD-L1蛋白。该检测试剂以细胞膜着色的肿瘤细胞占所有肿瘤细胞的百分率设定阈值，百分率大于等于1%定义为PD-L1表达阳性。PD-L1表达与非小细胞肺癌和头颈鳞状细胞癌患者服用Nivol umab后生存期延长有关， PD-L1表达与尿道上皮癌患者服用Nivol umab后应答率增加有关， PD-L1表达与黑色素瘤患者服用Nivol umab后的无进展生存期延长有关，该试剂不用于Nivol umab用药人群的判定，非伴随诊断试剂。

PD-L1 IHC 22C3 phar mDx

采用小鼠单抗22C3和EnVision FLEX可视系统，检测非小细胞肺癌、胃或胃食管交界处腺癌、食管鳞状细胞癌、宫颈癌、尿道上皮癌和头颈鳞状细胞癌患者肿瘤组织FFPE中的PD-L1蛋白。该试剂针对不同的癌种有不同的阈值设定方式，有的癌种以细胞膜着色的肿瘤细胞占可见肿瘤细胞的百分率设定阈值，有的癌种以细胞膜着色的肿瘤细胞、巨噬细胞和淋巴细胞占可见肿瘤细胞的百分率设定阈值。PD-L1抗体检测试剂用于辅助鉴别可使用Pembrol izumab治疗的非小细胞肺癌、胃或胃食管交界处腺癌、食管鳞状细胞癌、宫颈癌、尿道上皮癌和头颈鳞状细胞癌患者，为伴随诊断试剂。

VENTANA PD-L1（SP142）

采用兔单抗SP142和Opt iView DAB IHC检测试剂盒，检测尿道上皮癌和三阴性乳腺癌患者肿瘤组织FFPE中的PD-L1蛋白。该试剂有两种不同的阈值设定方式，一种以细胞膜着色的肿瘤细胞占可见肿瘤细胞的百分率设定阈值，一种以着色的肿瘤浸润免疫细胞占可见肿瘤细胞的百分率设定阈值，不同癌种具有不同的阈值。PD-L1抗体检测试剂用于辅助鉴别可使用Tecent r iq治疗的尿道上皮癌和三阴性乳腺癌患者，为伴随诊断试剂。

VENTANA PD-L1（SP263）

采用兔单抗SP263，检测尿道上皮癌患者肿瘤组织FFPE中的PD-L1蛋白。该试剂有两种不同的阈值设定方式，一种以细胞膜着色的肿瘤浸润免疫细胞占可见肿瘤细胞的百分率设定阈值，一种以细胞膜着色的肿瘤细胞占可见肿瘤细胞的百分率设定阈值。PD-L1表达与尿道上皮癌患者服用Durval umab后应答率增加有关，非伴随诊断试剂。

2018年，Pembr olizumab和Nivolumab免疫检查点抑制剂在我国获准上市。2019年，安捷伦的PD-L1 IHC 22C3 phar mDx抗体检测试剂在我国获准上市，该试剂检测非小细胞肺癌患者FFPE中的PD-L1蛋白，用于辅助鉴别可使用Pembr ol izumab治疗的非小细胞肺癌患者，为伴随诊断试剂。

    我国PD-L1抗体检测试剂注册申报相关问题探讨

临床定位

美国FDA已批准4个PD-L1抗体检测试剂，其预期用途可分为两大类：第一类是作为伴随诊断试剂，辅助鉴别可使用相关免疫检查点抑制剂治疗的癌症患者；第二类是作为补充诊断试剂，预测肿瘤患者对相关免疫检查点抑制剂药物应答的有效性。PD-L1抗体检测试剂在我国的临床定位应结合我国目前的临床实际需求以及申报产品提供的相关证据予以确定。

临床评价情况

PD-L1抗体检测试剂的临床评价一般包括：（1）申报试剂与相关免疫检查点抑制剂联合进行的药物临床试验；（2）申报试剂的临床检测性能，如不同临床试验机构、不同资质病理医生对不同特征临床样本的阅片重复性等。

境外临床数据

根据接受境外临床试验数据指导原则的相关要求，确定是否接受境外临床试验数据需从法规差异、临床实践差异及人种差异三方面考虑。在我国，可接受的PD-L1抗体检测试剂境外临床数据应包括我国人群的数据，一是因为免疫组化的结果判读受主观影响较大，且判读时存在细胞染色等干扰因素，这就导致免疫组化方法在国内外临床实践中存在差异；二是因为抗体试剂的有效性与所伴随的免疫检查点抑制剂的疗效息息相关。此外，对于境内外人群PD-L1蛋白的表达量是否具有一致性，现有文献尚未达成一致。免疫治疗的疗效除与PD-L1蛋白的丰度有关，还受肿瘤微环境的影响，比如肿瘤突变水平、肿瘤抗原丰度以及其他协同刺激因子的影响等，境内外人群的肿瘤微环境是否存在差异，现有文献也尚未达成一致。

审评机构间的沟通

PD-L1抗体检测试剂临床有效性的判定与其伴随的免疫检查点抑制剂的疗效有关，而伴随药物是否具有疗效需要由药物审评员进行判断，这就需要药物审评机构和医疗器械审评机构之间进行有效沟通，争取药物和试剂同步审评，同步上市。

产品说明书的规范

PD-L1抗体检测试剂与其伴随药物相互依存，互相匹配，因此，建议在试剂产品说明书中明确其伴随药物，内容包括药物生产厂家、药物通用名称和商品名称等。

作为临床急需的药物与检测试剂，免疫检查点抑制剂和PD-L1抗体检测试剂目前属于新兴的申报热点。如何进行科学审评、为临床提供安全有效的产品，需要我们深入了解二者相互作用的机制，研究并借鉴境外产品的审评经验，促进不同审评机构之间的沟通交流。